本文標題："顯微鏡下人工的方法培養(yǎng)細胞以進行病毒的接種"

顯微鏡下人工的方法培養(yǎng)細胞以進行病毒的接種

一、目的
顯微鏡下人工的方法培養(yǎng)細胞以進行病毒的接種
以人工的方法培養(yǎng)細胞以進行病毒的接種或增殖之用

二、原理

病毒不若細菌可以在人造之培養(yǎng)基上增殖，必須依賴活體細胞來製造病毒所

需之蛋白質(zhì)、酵素等，因此為達到增殖病毒之目的，必須先培養(yǎng)細胞，而人工培

養(yǎng)細胞又可分成初代細胞培養(yǎng)以及株化細胞之繼代培養(yǎng)，前者所取之材料為動物

內(nèi)臟、組織或胚胎，后者則為已癌化之細胞株，依病毒增殖之喜好選擇初代細胞

或株化細胞培養(yǎng)。

三、材料與設(shè)備

(一) 材料

1. 培養(yǎng)基（minimum essential medium; MEM）

2. 胎牛血清 (fetal calf serum; FCS)

3. 磷酸緩沖溶液（PBS; pH 7.2-7.4）

4. Vero 細胞株

5. 25 cm2 細胞培養(yǎng)瓶 (culture flask)

6. Dulbecco's PBS

7. citosol 麻醉劑

 8. RPMI-1640 細胞培養(yǎng)液

9. penicillin 及 streptomycin

10. Trypan blue 染劑

11. 24 孔平板培養(yǎng)皿

(二) 設(shè)備

1. 無菌操作臺

2. 倒立顯微鏡

3. 微量吸管(pipetman)

4. 塑膠吸管（1、5、10、20 ml）

5. 血球計算板

6. 真空幫浦

7. 二氧化碳培養(yǎng)箱